大战绿妖之后，蜘蛛侠帕克（托比•马奎尔 Tobey Maguire 饰）忍痛拒(jù )绝了他(tā )唯(wéi )一的挚爱玛丽（克尔斯滕•邓斯特 Kirsten Dunst 饰），因为蜘蛛侠的身份会为(wéi )自己和亲人带(dài )来巨大危险，帕克(kè )决定独立承担起蜘蛛侠的责(zé )任。　　帕克一直在忙于应付各种挑战：学习超能力的灵活运用；在超级英雄与平凡大学生的双重身份下隐藏自我、小心翼翼地生活等等。帕克对(duì )玛丽越来越难(nán )以自拔，但是作为蜘(zhī )蛛侠又不能对玛丽展开(kāi )心扉。　　好友哈利因为误会蜘蛛侠而一直处处与其(qí )为作对；唯一的亲人婶婶也对蜘蛛侠的真实身份产生了怀疑。同时(shí )，新的挑战又出现了：邪恶而强大的章鱼博士。帕克在种种压力下肩负起蜘蛛侠的使命。